重新定向技术在骨髓干细胞抽吸中具有优势

作者：句朝晖 北京积水潭医院

骨髓抽吸是收集各种组织细胞的有效方法，但与外周血稀释有关。Patterson发现髂骨松质骨内63.5%的结缔组织祖细胞存在于小梁表面。因此，要获得最大数量的细胞是一项困难的任务，对于哪种方法优于其他方法还没有共识。尽管骨髓抽吸已经被描述了70多年，但对1580项研究的回顾显示，他们报告的信息仅涉及已确立的最低报告标准中42%的变量 + 人类骨髓中的细胞首次在更大范围的患者身上发表。在最初的几十年里，骨髓采集主要用于诊断目的。随着再生医学的兴起和骨关节炎II级证据的增加，干细胞治疗变得越来越重要。这就需要一个最佳的收获程序，在这个程序中，可以通过微创程序获得最大的细胞产量。然而，用于骨关节炎治疗的抽吸液的最佳细胞组成仍然未知。外科医生一致认为，应实现高细胞数量和高存活率，因此，已描述了不同的收获技术。总体而言，该技术在过去十年中有所恶化。尽管临床骨科文献中存在不同的干细胞制备治疗方案，尚不清楚哪种类型的（单核）细胞（CD34 + , 间充质干细胞[MSCs]等）可与临床成功相关。此外，骨髓间充质干细胞只能用其他几种标记物间接测量，并用菌落形成单位进行培养和评估，而CD34 + 可以直接测量细胞。这两种细胞类型代表骨髓来源的单核细胞的一小部分。因此，为了评估新的收获技术，建议从实验室中排除尽可能多的分析前和分析后混杂因素。因此，CD34的测量 + 单细胞（约占所有骨髓源性单核细胞的1%），而不是间接测量和培养MSCs足以确定单核细胞数量。
近年来，出现了各种不同的骨髓采集医疗设备，到目前为止，以下四个问题（位置、针头、体积、技术）仍然悬而未决，相关论文仍存在争议：
Q1：什么是骨髓抽吸的最佳场所？Pierini表示，髂后嵴优于髂前嵴，但这只涉及到集落形成结缔组织祖细胞的产量；McLain发现髂骨嵴和椎骨之间的有核细胞计数没有差异，椎骨的结缔组织祖细胞的生物学活性和流行率与髂骨嵴的细胞相似。颈动脉瘤显示，单核细胞的浓度和来自髂骨嵴的细胞分化潜能高于来自股骨远端和胫骨近端的细胞。
然而，在临床实践中，如果可以仰卧位从髂嵴腹侧部分采集细胞，或者如果患者必须处于俯卧位或侧卧位（气道控制更困难）才能到达髂棘后部，则会产生差异。Hernigou表示髂骨的安全区和不安全区。
Q2：哪个针头最好？大多数骨髓穿刺针的直径范围为1至3毫米，在某些情况下，使用钝的曼氏针。一些针头长1.5厘米，而其他针头长达6厘米。大多数针头在针尖有一个抽吸孔，而Marrow Cellution®针头有一个钝的针尖，通过侧面的多个侧面孔抽吸。然而，这种特殊的针头必须使用锤子插入骨头内部深处，直径大，成本高。相比之下，Argon®针头的成本大约低100倍，而且由于它更薄，可以很容易地用手插入骨头。Glinn发现手动骨髓活检标本中的抽吸伪影比用电动装置获得的标本少。
Q3：应检索哪个卷？1997年Muschler赞成小容量技术。然而，这与2009年Fennema的观点相矛盾，Fennema发表文章称，为了降低细胞数低的风险，至少应抽吸8ml，并且“从同一部位，第二次抽吸或抽吸 > 相比之下，2013年，Hernigou再次强调了小体积和小注射器对骨髓间充质干细胞的好处。Abazovic报告说，他通常使用3毫米厚的针吸80毫升，因为他想收集尽可能多的细胞。
Q4：应该使用哪种技术？只有少数出版物详细描述了骨髓抽吸技术；此外，在近60%的出版物中，这些信息要么缺失要么不足 × 30毫升单点技术.Abazovic报道2 × Olivier没有发现多位点技术的细胞产量明显高于单位点技术，但仅包括6例患者。骨髓采集技术的异质性可能解释了干细胞出版物的临床结果不一致以及不同研究之间的细胞计数差异。最近的出版物要求对使用的技术进行精确的指导。然而，对于如何正确地进行这项工作知之甚少。
因此，本研究的目的是找到CD34产量最高的技术 + 细胞和细胞的最大活力。因此，我们在一项涉及以下内容的前瞻性盲研究中比较了这4个参数：（1）髂嵴的不同抽吸部位（前与后）。（2） 各种类型的针头（直径1-3 mm，侧向抽吸与针尖抽吸，1欧元至600欧元）。（3） 各种体积的注射器（10–30毫升）。（4） 两种不同的抽吸技术（传统技术与重新定向技术）。